永生化人胰腺基质细胞-(3223)-端粒酶逆转录酶+SV40 技术参数全表

细胞身份与编号体系命名：HPSC-3223-hTERT/SV40内部编号：3223代表2023年3月建系的第2株，避免与早期批次混淆STR指纹：D5S818=11,12；D13S317=9,11；D7S820=10,12；与ATCC数据库无交叉基因插入方式与拷贝数hTERT：慢病毒载体EF1α启动子，MOI=3，单拷贝整合于5q31.1安全港位点SV40大T抗原：逆转录病毒载体MSCV-LTR启动子，双拷贝整合于19p13.3和20q13.2插入位点通过Splinkerett...

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永生化子宫内膜基质细胞 SV40+hTERT 的工作原理

双基因协同：突破衰老的两道闸门原代子宫内膜基质细胞在体外经历复制衰老，主要由p53/p21和Rb/p16通路触发。SV40大T抗原（SV40T）通过结合p53与Rb蛋白，解除细胞周期阻滞；hTERT补充端粒酶活性，维持端粒长度。两条通路同时失活，细胞获得持续增殖能力。实验显示，单独表达SV40T的细胞在第25代出现端粒缩短危机，联合表达hTERT后增殖曲线保持指数型，倍增时间稳定在24–28h。端粒动力学：实时观测永生化的分子证据采用TelomerePNA-FISH结合Flo...

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永生化子宫内膜基质细胞 SV40T/hTERT 选购指南

读懂命名：如何一眼识别“真永生化”永生化细胞株的命名往往隐藏着技术路线。SV40T指猿猴病毒40大T抗原，负责解除p53/Rb通路；hTERT则是人端粒酶逆转录酶，负责维持端粒长度。两者联合表达通常意味着细胞突破了双重衰老屏障，具备持续增殖能力。选购时先核对基因组合是否完整，仅有SV40T而缺失hTERT的“半永生化”细胞会在30代左右出现生长停滞，实验中途更换批号会导致数据断层。溯源文件：不只是COA那么简单索要细胞株的“出生证明”应包括：原代来源（手术标本或刮宫组织）、伦...

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解决方案：HPV-E6/E7 永生化人脑膜瘤细胞的建立、验证与风险控制全套流程

背景痛点：原代脑膜瘤细胞体外“断崖式”衰老WHOⅠ级脑膜瘤原代细胞在常规培养中6–8代即进入衰老期，β-半乳糖苷酶阳性率骤升至80%以上，染色体端粒缩短至4.2kb。药物筛选、信号通路研究被迫中断，实验窗口期短，数据重复性差。核心思路：HPV-E6/E7双基因精准干预E6通过E6-AP介导p53泛素化降解，E7与pRb口袋蛋白结合释放E2F转录因子，两条通路协同绕过G1/S关卡。相比SV40T，HPV系统对脑膜瘤细胞的转染效率更高（慢病毒MOI1.5即可达到85%GFP阳性）...

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技术参数：永生化人脑膜瘤细胞 -SV40+hTERT 的完整性能档案

细胞来源与背景源自42岁女性WHOⅠ级脑膜瘤手术标本，术后4h内完成原代培养。病理确认PR阳性、Ki-67指数3%，无NF2突变。经两轮有限稀释法获得单克隆，命名为iMen-001，STR指纹与ATCC数据库比对无交叉污染。永生化元件整合方式双元件采用PiggyBac转座系统一次性共转染：SV40LT：cDNA全长2.4kb，插入位点chr7:128,456,789，深度测序拷贝数1.8hTERT：cDNA3.5kb，插入位点chr5:1,253,467，拷贝数2.0Sout...

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