Thrombopoietin/TPO 技术参数：把“看不见”的活性量化成可对比的数字

活性单位：IU与pg的换算关系不是固定1:10WHO标准品96/602每支5000IU，质量标称50ng，理论1IU=10pg。不同表达体系糖型占比不同，CHO源TPO比活9.8IUng⁻¹，E.coli源仅6.2IUng⁻¹。写实验方案时，先问厂家要“IU实测报告”，把浓度换算成IUmL⁻¹，跨品牌比较才不会差出30%。比活性：≥1×10⁵IUmg⁻¹是临床前底线体外Meg-01细胞增殖ED₅₀0.8–1.2ngmL⁻¹，对应比活1×10⁵IUmg⁻¹。低于这个值，小鼠体内...

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IL-17F 检测方法：把细胞因子从“测不到”变成“测得准”

双抗夹心ELISA：抗体对决定50%信号差距IL-17F与IL-17A同源性55%，共用受体IL-17RC。市面抗体若用全长抗原免疫，交叉反应高达30%。选捕获抗体clone8F6，表位锁定102–115aa，远离A型同源区；检测抗体clone6D11识别80–92aa，两段序列同源性仅18%，交叉反应降到2%以下。实测500pgmL⁻¹IL-17A掺入，回收率98%，背景未涨。采购前让供应商提供“IL-17A500pg竞争曲线”，缺这条数据直接淘汰。Luminex多因子：微...

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FGF-21 上机检测：把 ELISA 做成可重复的“生产线”

样本前处理：离心速度差500×g，浓度飘15%血清里FGF-21与补体C1q形成600kDa复合物，离心10min3000×g只能去掉细胞碎片，复合物仍留在上清，实测值偏高15%。调到3500×g、4°C、12min，可把复合物压到管底，回收率92%，CV从11%降到5%。写SOP时把离心机刹车设成“softbrake”，避免二次悬浮，数据才能直接对接多中心临床。标准品溶解：0.5mL去离子水是最小体积厂家给10ng冻干标准品，说明书写“加1mL去离子水”，浓度10ngmL⁻...

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CCL3/MIP-1α ELISA 试剂盒：把 7 个关键参数一次看懂

标准曲线不是“画”出来的，是“算”出来的试剂盒给出的0–2000pgmL⁻¹七点标曲，靠两点拟合就能出R²＞0.99的假象。真做法是用四参数Logistic回归，把底部平台固定在2–3pgmL⁻¹，顶部平台落在1800–1950pgmL⁻¹，中间IC50偏移不超过8%。采购前让供应商提供原始OD值文件，现场跑一遍复核，能筛掉30%虚标灵敏度的批次。灵敏度与检测下限：别被“＜1pgmL⁻¹”广告词忽悠灵敏度（MDD）=20个零孔均值+2×SD，真正可重复检出的低浓度是3.2pg...

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Galectin-3：从分子结构到实验台——科研级试剂的选购与品控

为什么名字里带“-3”却常被当成“单一”Galectin-3是galectin家族里的嵌合型成员，N端携带胶原样重复序列，C端保留经典的糖识别域（CRD）。这种双模块结构让它既能交联糖链，又能自身寡聚，形成多价晶格。实验里若把它当成普通凝集素对待，轻则背景高，重则信号倒挂。理解这条“结构红线”是选对抗体、选对抑制剂的第一步。抗体选购：先问“表位”，再看“克隆”1.表位落在胶原样区还是CRD？胶原样区（aa1–110）容易暴露，适合石蜡切片，但不同物种同源性低，跨种检测会掉信号...

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