ANGPTL4 蛋白：不踩坑的选购路线图

先定物种，再看糖基化人源ANGPTL4有406aa，小鼠多4aa，抗体交叉反应掉50%。CHO表达带3个N-糖位点，昆虫细胞只有1个，糖量差异让表观分子量从45kDa飘到55kDa。写采购单时把“糖型谱一致性”写进备注，厂家会附送LC-MS糖谱图，避免WB条带对不上。标签位置：N-His还是C-His决定下游走向N-His-ANGPTL4：金属螯合层析得率12mg/L，纯度高，但标签靠近N端卷曲螺旋域，LPL抑制活性掉20%。C-His：得率8mg/L，活性保留95%，适合脂...

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IGFBP-6：把“测不到”变成“测得准”的操作手记

先认亚型，再开实验人源IGFBP-6全长240aa，分泌后N端24aa信号肽被切，循环以22kDa形态存在。小鼠多一段3aa插入，抗体跨种属识别掉50%信号。下单蛋白前，把物种、剪接版本写进采购备注，避免Western白板。样本类型：血清vs脑脊液，稀释曲线不在一条线血清IGFBP-6浓度150–250ng/mL，含大量IGF-II复合物，ELISA需酸解离30min，否则信号被遮蔽70%。脑脊液浓度只有5–15ng/mL，酸解离步骤可省，直接上样100µL，标准...

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MICA：让“找不到抗体”成为过去式的选购清单

先认等位基因，再谈实验MICA全长6.2kb，5个常见等位基因占据人群90%频率。MICA*008缺失6个GCT重复，分子量比*004小2kDa，SDS-PAGE位置直接偏移。采购前把细胞STR报告翻出来，等位基因写进采购系统备注，抗体公司会按对应序列做亲和测试，避免到货再换货浪费两周。蛋白版本：胞外区起点决定糖型75-308aa：昆虫细胞表达，Man₉GlcNAc₂高甘露糖型，适合结晶，SPR信号干净。25-308aa：含部分柄区，HEK293表达，复杂糖型，与NKG2D结...

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MICB 人组织相容性复合体 I 类相关基因 B：从序列到功能的选购决策地图

分子画像：把“MICB*004:01与*008分不清”写在采购单第一行MICB高度多态，胞外α1α2平台5个经典位点决定抗体结合角度。实验室常用的是*004:01（胞外83-215aa），但肿瘤系普遍携带*008（Arg145Gly），导致商品化抗体6D4识别效率掉40%。下单前先做细胞STR鉴定，把等位基因写进采购备注，能省一次3000块的重复订单。蛋白形式：His标签位置决定后续实验走向C-His：适合夹心ELISA，检测限8pg/mL，但金属螯合层析时α2域容易部分解折...

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P4HB 脯氨酸 4-羟化酶β亚基：细胞应激与胶原合成的“隐形引擎”

核心定位：β亚基≠配角，而是催化-折叠-氧化还原三合一枢纽实验室里常把P4HB当作“脯氨酸4-羟化酶β亚基”简单标注，结果下游WB、IP、CRISPR都踩坑。它同时携带：肽酰-脯氨酰4-羟化酶活性中心（α亚基催化，β亚基稳定）；蛋白二硫键异构酶（PDI）结构域，直接决定胶原三股螺旋能否正确折叠；内质网氧化还原传感器，调控ERO1α介导的H2O2输出。一句话：没有β亚基，胶原羟化反应空转，ER应激通路30min内爆表。工作原理深描：从O2结合到二硫键洗牌催化环：α亚基Fe²⁺-...

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