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2025-1027
免疫原与纯度底牌A21030用完整山羊IgG分子对新西兰大白兔进行超免疫,血清先过ProteinA亲和柱,再跑山羊IgG预吸附柱。出厂COA里写纯度≥97%,SDS-PAGE检测重链50kDa、轻链25kDa条带无杂带,实际银染能看到0.3%山羊白蛋白残留,对大多数应用不构成干扰,做山羊源Co-IP时需要在封闭液里额外加1%山羊血清做竞争阻断。效价单位与实测差距ELISA效价≥1:200000是厂家标板数据,板底包被100ng山羊IgG。自建实验把包被量降到10ng,效价仍维...
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2025-1027
开盖前先做三件事A21020到手先别急着稀释。离心30s把管壁液滴收到底部,涡旋3s让甘油分散均匀,再快速离心一次。这一步能把浓度误差拉到5%以内,后续条带灰度重现性直接提升一个量级。稀释液配方实测对比PBS-T加5%脱脂奶是常用体系,背景控制到0.05AU以下。做磷酸化蛋白把奶换成3%BSA,奶里自带碱性磷酸酶会把p-ERK条带吃掉。荧光二抗体系直接上TBS-T,PBS里钠离子会让Alexa647量子产率掉12%。HRP系统想再省抗体,把Tween-20降到0.02%,A2...
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2025-1027
为什么二抗决定Western成败WB条带发虚、背景发灰、荧光淬灭快,90%的troubleshoot最终追到二抗。山羊抗小鼠IgG是实验室用量最大的二抗,批次差一个字母,效价能掉三倍。A21010这款货号在采购目录里出现频率高,先把关键指标拆开看,再决定要不要下单。先看宿主与交叉A21010宿主是山羊,免疫原为小鼠IgG全分子,通过免疫亲和层析去掉山羊内源IgG,交叉反应谱系写得很干净:小鼠IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3全部识别,不与兔、大鼠、人、牛血清反应。多色...
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2025-1024
命名迷宫:Adiponectin到底有几个货号文献出现ADP、Acrp30、ApM1、GBP28都是同一蛋白,订购时优先用"Adiponectin"做关键词基因符号ACDC、APM1常用于核酸试剂,蛋白商品名极少带这些后缀人源、小鼠、大鼠序列同源性83%,跨物种做实验必须选同源蛋白,否则ELISA信号掉70%全长vs球状域:功能决定长度全长244aa三聚体用于代谢研究,可激活AMPK磷酸化球状域gAd104aa专做心肌保护,浓度低至50ng/mL就能减少梗死面积30%胶原域缺...
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2025-1024
开箱验收:检查三件套泡沫箱内层温度记录条≤8°C视为合格干冰残留≥200g说明全程冷链未断核对瓶身货号、批次与COA全一致,避免混发IgG1事件重演复溶公式:别让粉末变絮状冻干粉先回温25°C十分钟,减少冷凝水吸入按1mg加1mL无菌超纯水,沿壁缓慢注入,禁止涡旋静置15min后1000g轻离30s,去掉气泡,浊度立即降到0.05AU浓度核准:A280与RI双通道消光系数1.39(mg/mL)^-1cm^-1,直接读A280最省事若含5%蔗糖保护剂,RI折射率偏移0.0003...
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