过氧化氢酶(CAT)是生物体内清除活性氧(ROS)的关键抗氧化酶，广泛存在于细胞(如肝细胞、红细胞)及组织中，能将有毒的过氧化氢(H₂O₂)分解为水和氧气(2H₂O₂→2H₂O+O₂)，保护细胞免受氧化损伤。过氧化氢酶检测试剂盒通过特异性检测CAT活性(通常以单位时间内H₂O₂分解量表示)，成为评估机体抗氧化能力、研究氧化应激相关疾病(如衰老、神经退行性疾病)及药物疗效的核心工具。
一、核心原理：
主流试剂盒采用“过氧化物模拟底物法”(如邻联茴香胺法或钛盐比色法)，其逻辑是通过CAT催化H₂O₂分解后，剩余H₂O₂与特定显色剂反应生成有色产物(如醌类化合物)，通过分光光度计测量吸光度(通常波长405-600nm)间接推算CAT活性。以经典钛盐法为例：样本中的CAT先与已知浓度的H₂O₂溶液孵育(37℃，反应时间5-10分钟)，催化部分H₂O₂分解；剩余H₂O₂与钛离子(Ti⁴⁺)形成稳定的黄色钛-H₂O₂复合物，该复合物在410nm处有较大吸收峰，吸光度值与剩余H₂O₂浓度成正比，通过标准曲线(预先用已知浓度H₂O₂制作)计算剩余量，进而得到CAT分解H₂O₂的量(单位：U/mL或U/g组织)，活性越高，吸光度越低。
二、典型应用：
•疾病机制研究：在衰老模型(如老年小鼠肝脏)中，CAT活性通常显著低于年轻对照组(降幅可达30%-50%)，试剂盒可量化这种变化，揭示氧化应激与器官功能衰退的关联；在帕金森病研究中，检测患者脑脊液或血液中的CAT活性(通常低于健康人群)，辅助判断神经元抗氧化防御能力受损程度。
•药物疗效评估：抗氧化药物(如维生素C、谷胱甘肽前体)或中药提取物(如丹参酮)的研发中，需通过试剂盒对比给药组与对照组的CAT活性差异(如给药后肝组织CAT活性升高20%以上)，验证其能否增强内源性抗氧化防御。
•环境毒理学：检测重金属(如铅、汞)或农药(如有机磷)暴露人群的血液CAT活性(毒性物质通常抑制酶活性)，评估环境污染对机体氧化应激的影响，为制定安全阈值提供数据支持。
•食品与保健品：在功能性食品(如蓝莓汁、坚果提取物)的质量控制中，检测其CAT活性(或促进机体CAT表达的能力)，判断产品的抗氧化功效真实性。
操作时需注意样本类型(血清/组织匀浆的上样量一般为10-50μL，避免过高蛋白浓度干扰显色)，反应温度(37℃恒温确保酶活性稳定)，以及比色时间(通常孵育10分钟后立即读数，防止H₂O₂全部分解导致信号丢失)。过氧化氢酶检测试剂盒以其高特异性(可区分CAT与其他抗氧化酶如超氧化物歧化酶SOD)与灵敏度(检测限低至0.1U/mL)，成为解析氧化还原平衡的“金标准”工具。
更新时间：2025-09-10
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