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尿酸(UA)检测试剂盒操作使用指南

更新时间:2026-01-26点击次数:61

检测前准备

尿酸(UA)检测试剂盒的准确使用始于规范的前期准备,这直接影响检测结果的可靠性。

样本采集与处理

临床常用样本为血清、血浆或尿液,需根据试剂盒说明书选择适配样本类型。以血清样本为例,采集空腹静脉血后,应使用无抗凝剂真空管,避免溶血(红细胞破裂会释放尿酸酶,导致检测值偏低)。血液采集后需在2小时内离心(3000rpm,10分钟)分离血清,若无法立即检测,血清应冷藏(2-8℃)保存,保存时间不超过24小时;长期保存需冷冻(-20℃以下),避免反复冻融。尿液样本需收集新鲜中段尿,避免混入杂质,若需定量检测,应记录24小时尿量并充分混匀后取样。

试剂盒与仪器检查

使用前需检查试剂盒包装是否完好,确认未过有效期(通常试剂盒有效期为12-18个月,开封后应在说明书规定时间内使用,如2-8℃保存28天)。查看试剂组分(如酶试剂、校准品、缓冲液等)是否齐全,有无沉淀、变色或浑浊(正常应为澄清液体,出现沉淀可能因低温储存,可37℃水浴复溶后观察,若无法溶解则试剂失效)。同时准备配套仪器,如半自动生化分析仪、移液器(建议使用20-200μL可调量程,确保精度)、恒温水浴锅(控制孵育温度±0.5℃),使用前校准移液器,检查仪器波长是否与试剂盒要求一致(常见检测波长500-550nm)。

环境条件控制

操作需在洁净、无风的实验台进行,避免阳光直射(部分试剂对光敏感,如还原型辅酶Ⅰ易分解)。室温控制在15-30℃,湿度40%-60%,湿度过高可能导致试剂潮解,过低则可能使样本蒸发。

标准操作流程

遵循“样本-试剂反应-信号检测"的核心逻辑,按步骤执行以减少误差。

试剂准备

根据检测项目(如尿酸酶-过氧化物酶法),按说明书比例混合试剂。例如,将酶试剂与缓冲液按1:5比例稀释,轻柔颠倒混匀(避免剧烈震荡产生气泡,气泡会干扰比色),稀释后试剂需在室温平衡15分钟,确保反应温度稳定。若使用冻干校准品,需用专用复溶液溶解,静置10分钟使充分溶解,期间避免搅拌(防止蛋白变性)。

加样与孵育

取洁净反应管,依次加入校准品/样本和试剂。以200μL体系为例:加入5μL样本(或校准品),再加入195μL稀释后试剂,用移液器吹吸3次混匀(吹吸时避免接触管壁,防止液体残留)。将反应管放入37℃恒温水浴锅孵育10分钟(孵育时间需严格控制,时间不足会导致反应不-完-全-,过长可能引发副反应),期间避免晃动水浴锅。

信号检测

孵育结束后,立即将反应管放入生化分析仪或分光光度计,在规定波长下读取吸光度值。若手动检测,需以空白试剂(仅缓冲液+酶试剂)调零,确保每次检测前校准仪器零点。记录吸光度后,根据校准曲线计算样本尿酸浓度(部分试剂盒提供标准曲线方程,或通过校准品浓度与吸光度的线性关系推导)。

关键注意事项

操作细节直接影响结果准确性,需重点关注以下方面。

样本质量控制

溶血、脂血、黄疸样本会干扰检测:溶血样本中红细胞释放的腺苷酸代谢产物会增加尿酸检测值;脂血样本因乳糜微粒散射光,导致吸光度假性升高;黄疸样本中的胆红素会抑制过氧化物酶活性,使结果偏低。遇此类样本,应重新采集或使用具备抗干扰能力的试剂盒(需提前查看说明书抗干扰指标)。

试剂使用规范

不同批次试剂不可混用(批次间存在差异,可能导致校准偏差)。试剂开封后需按要求保存,如酶试剂需2-8℃冷藏,避免反复取出室温放置(温度波动会影响酶活性)。加样时需更换吸头,避免交叉污染(如校准品与样本间污染会导致结果漂移)。

操作时间管理

从样本离心到检测完成,建议在1小时内完成(尤其夏季室温较高时,样本中尿酸易分解)。若检测样本量较大,可分批次处理,避免试剂长时间暴露在室温中(酶试剂在30℃以上放置超过30分钟,活性可能下降10%以上)。

结果判读与报告

检测结果需结合参考范围与临床背景,避免单一数值解读。

参考范围确认

不同人群尿酸参考值存在差异:成人男性通常为208-428μmol/L,女性155-357μmol/L(绝经后接近男性),儿童119-327μmol/L。检测报告中需注明样本类型(血清/尿液)、检测方法(如尿酸酶法)及参考范围来源(如WS/T 404.2-2018《临床常用生化检验项目参考区间》)。

结果异常处理

若样本尿酸值超出参考范围,需排除操作误差(如试剂失效、加样错误),建议重新检测。若复测结果仍异常,结合临床症状(如关节疼痛、血尿),提示可能存在高尿酸血症或痛风风险,需建议进一步检查(如肾功能、尿常规)。

联系方式

027-59716789

(全国服务热线)

武汉市生物加速器c17-2

gaoshu.wang@abbkine.com

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