MICB 人组织相容性复合体 I 类相关基因 B：从序列到功能的选购决策地图

分子画像：把“MICB*004:01 与 *008 分不清" 写在采购单第一行

MICB 高度多态，胞外 α1α2 平台 5 个经典位点决定抗体结合角度。实验室常用的是 *004:01（胞外 83-215aa），但肿瘤系普遍携带 *008（Arg145Gly），导致商品化抗体 6D4 识别效率掉 40%。下单前先做细胞 STR 鉴定，把等位基因写进采购备注，能省一次 3000 块的重复订单。

蛋白形式：His 标签位置决定后续实验走向

• C-His：适合夹心 ELISA，检测限 8 pg/mL，但金属螯合层析时 α2 域容易部分解折叠，下游做 BLI 会出现批量漂移。

• N-Avi-His：生物素定点标记，一步法纯化后 DLS 多分散指数 <0.08，适合流式微球定量。

• 无标签：晶体学黄金标准，纯度 ≥98%，得率只有带标签的 1/3，预算要乘以 2.5 倍。

抗体对：别只看克隆号，先看表位竞争图谱

提示：做肿瘤微环境双染，直接选 2F9-AF647 + CD45-AF488，补偿矩阵一次性通过，不用反复调电压。

基因检测：qPCR 引物避开 Alu 重复区

人基因组 AluY 在 MICB 3'UTR 有 218 bp 同源段，常规引物容易扩出非特异条带。设计时把反向引物放在 3'UTR 末端 25 bp 外，Tm 差控制在 1 °C 以内，扩增效率 98%，SD 0.08。探针选 FAM-BHQ1，拷贝数线性区间 10²–10⁷，避免 Ct 值 35 以后还在硬算。

微球标准品：冻干 vs 液体，运输温度是隐藏成本

冻干微球 4 °C 运输，重悬后 CV<5%，但复溶 4 h 内不用完活性掉 20%。液体微球 -80 °C 托运，干冰费用 600 元/次，适合高通量平台；小实验室月用量 <200 测试，直接选冻干，平均下来单个样本省 4 块。

售后指标：把“批次间 CV"写进合同

行业默认批次间荧光强度 CV≤8%，但 MICB 抗原表位依赖糖基化，不同批次昆虫细胞表达谱有漂移。合同里加一条：到货 7 日内做流式 SOP 校准，CV>8% 直接整批退换，运费厂家承担。过去三年统计，能拦下 12% 的隐性次品。

价格陷阱：按“测试数"计价最透明

市面上有按 µg 计价、按反应数计价、按板计价三种模式。换算成 1000 测试：

• µg 模式：需要 200 µg，单价 1800 元/100 µg，总价 3600 元

• 测试数模式：1000 测试 2200 元，送 100 测试质控品

• 板模式：5 块 96 孔板 2800 元，拆开后 30 天用完，过期报废 15%

结论：月样本量 >800 选测试数，<300 选 µg 模式，中间值选板模式会剩半板，浪费比高达 22%。

现场验收：三步法 15 分钟完成

1. 扫码批号，比对 COA，确认糖基化谱图无新增杂峰

2. 取 5 µL 微球 + 50 ng 6D4 抗体，流式 30 s，荧光强度落在参考值 ±10%

3. 打开 Gitter 云记录，自动上传数据，厂家后台 24 h 内给出电子签章，质保期从签章日起算