T3 ELISA 试剂盒技术参数：把“pg 级”误差压进临床可接受区间

灵敏度层级：分析灵敏度 0.05 ng/mL 只是门票

说明书首页常写 0.05 ng/mL，这是 2 SD 零孔对应浓度，只能用来写标书。真正决定能否区分正常低限的是功能灵敏度：连续三天、每天三批、CV 20% 对应的浓度。优质试剂盒能把功能灵敏度压到 0.15 ng/mL，低于这个值，亚临床甲亢样本会被当成“0"处理，直接漏诊。

检测区间：0.15–8.0 ng/mL 如何做到不稀释也能覆盖 95% 血清

T3 正常参考 0.8–2.0 ng/mL，甲亢高峰 4–6 ng/mL。曲线采用 8 点定标，最高 8.0 ng/mL，回收率 90–110%，省去手工稀释步骤。厂商用高亲和力抗体（Ka≥1.2×10¹¹ L/mol）把平台区拉到 8 ng/mL 以上，避免“高值平台"导致信号回跌。实验室验收时拿 6 ng/mL 质控回算，偏差＞8% 直接退货。

精密度拆解：批内 CV 5%，批间 CV 8% 靠什么实现

微孔板采用单克隆抗体 3C7 包被，亲和层析纯化后浓度固定在 1.2 μg/mL，板间差异控制在 ±5%。酶标抗原使用 1:1 定向偶联，HRP 活性每批差异＜3%。标准品采用 6 M 盐酸胍处理人血清，去除结合蛋白，冻干批间赋值差异 ≤2%。三者叠加才能把批间 CV 压到 8% 以内，满足 CAP 室间质评 ±15% 容忍度。

交叉反应：T4、rT3、3,3'-T2 的“防火墙"

克隆 3C7 表位锁定在内环 3'-碘位置，对 T4 交叉 0.05%，对反 T3 0.08%，对 3,3'-T2 0.12%。实验员拿到高 T4 甲减样本，T3 仍落在 0.5 ng/mL 以下，就能体会抗体筛选的含金量。验收时要求厂商提供 100 ng/mL T4 添加实验，回算 T3 浓度应＜0.05 ng/mL。

回收率与稀释线性：2 倍、4 倍、8 倍稀释 r＞0.999

甲亢样本 6 ng/mL 做 1:2、1:4、1:8 稀释，回收率 95–105%，线性回归 r≥0.999。抗体浓度经过矩阵优化，避免“前带效应"导致高值稀释后偏高。实验室自建 1:2 稀释方案时，用 1% BSA PBS 做稀释液，血清蛋白浓度保持在 20 mg/mL，防止非特异吸附。

钩状效应安全区：＞50 ng/mL 才出现假低值

竞争法钩状效应出现在标记抗原被“淹没"时。试剂盒把抗体包被量降到 0.8 μg/mL，标记抗原浓度提高到 1:4000，钩状点推到 50 ng/mL，远高于临床可见峰值。验收时加标 30 ng/mL，回算值应落在 28–32 ng/mL，确保甲亢样本不会假低。

校准品不确定度：k=2 时 3.2% 如何传导到结果

校准品赋值 2.0 ng/mL，扩展不确定度 0.064 ng/mL。按误差传递公式，样本浓度 2.0 ng/mL 时合成不确定度 0.07 ng/mL，覆盖因子 k=2 得 0.14 ng/mL。报告单上 2.0±0.14 ng/mL 让临床医生一眼看出测量可信度，避免把 0.2 ng/mL 波动当成治疗依据。

稳定性条款：4 ℃ 14 个月、−20 ℃ 24 个月的底层逻辑

抗体包被板用 3% 海藻糖 + 0.5% 甘露醇做冻干保护，37 ℃ 加速 7 天，活性损失 ＜5%，折算 4 ℃ 14 个月。酶标抗原加 0.02% Proclin 300 + 0.1% BSA，−20 ℃ 反复冻融 5 次活性损失 ＜3%。实验室收到试剂立即拆 1 条板做 0 标准，OD 值比出厂报告掉 10% 以上直接退货。

云端曲线追溯：每块板自动生成二维码

试剂盒附带小程序，扫码上传 8 点定标 OD，云端实时计算斜率、EC50、r 值。若 EC50 偏移＞8%，系统推送“批间漂移"警告，实验员可提前更换试剂，避免当天 200 份样本重测。