抵抗素 ELISA 试剂盒选购指南：别让 96 孔板变成 96 个坑

1. 先确认测的是谁：RETN 还是 RETN1？

抵抗素基因符号在 NCBI 被归并成 RETN，但早期文献里 RETN1、XCP1、HXCP1 仍在流通。采购前把基因 ID 锁定到 56729，核对试剂盒抗体针对的抗原表位位于成熟肽段 17-108 aa，就能把 MGC126603、PRO1199 这类旧称带来的歧义挡在门外。说明书里只要出现“cross-react with RETN2"字样，直接放弃，人类没有 RETN2。

2. 抗体对决定动态范围，别只看标称灵敏度

抵抗素在空腹血清里约 4–20 ng/mL，肥胖或炎症人群可冲到 50 ng/mL 以上。把样本分布画成直方图，你会发现 90% 数据落在 5–30 ng/mL。选购时要求厂家提供 8 点校准曲线原始 OD 值，用四参数 Logistic 回算，确保 5 ng/mL 点落在 20–80% B/B0 区间，否则低端数据会被强制归零。真正有用的动态范围是 1–100 ng/mL，低于 1 ng/mL 的灵敏度对临床血清只是数字游戏。

3. 样本类型写进合同，避免“可测血清/血浆"模糊句

抵抗素与血小板上 TLR4 结合，采血后 30 min 内不离心，浓度会虚假升高 15–25%。试剂盒说明书必须写明：采集后 2 h 内 1 000 g 离心 15 min，血浆使用 EDTA 抗凝，肝素锂会产生 8% 负偏差。若实验室只做指尖血，选经过 1:5 稀释验证的试剂盒，原装 100 μL 上样量遇到微量样本直接报废。

4. 校准品溯源链：有 WHO NIBSC 代码吗？

抵抗素尚无国际参考品，但优质厂家会用内部储备品与 NIBSC 96/602（IL-6 参考品）做平行标定，给出“等同 IL-6 活性单位"换算。要求 COA 上标注储备品批号、-80 °C 冻存年限、复溶后偏差 <±5%。缺失这一项，不同批次试剂盒测同一肥胖队列会出现 0.8–1.2 倍的系统偏移，文章投稿时审稿人一定会卡。

5. 板内布局：预包被 vs 即时包被

抵抗素分子含两对分子内二硫键，包被板烘干后活性下降。预包被板看似方便，运输途中 37 °C 暴晒 48 h 即可损失 30% 活性。选“即时包被"套件：抗体冻干粉 4 °C 保存，包被缓冲液随用随配，2–8 °C 过夜即可。实验周期多 1 天，但批间 CV 从 12% 降到 6%，做大队列时省下的重复样本成本远高于多耗一晚。

6. 读板波长：450 nm 单波长够用吗？

抵抗素 ELISA 常用 TMB 显色，终点法 450 nm 读数。血清中高胆红素样本 OD 会抬升 0.05–0.08，相当于 2–3 ng/mL 假阳性。要求试剂盒提供双波长设置：450 nm 主读，620 nm 参比，差值算法把胆红素干扰压到 <1 ng/mL。老型号酶标仪若无 620 nm，用 570 nm 也能凑合，但阈值要重新验证。

7. 批次一致性：让厂家跑 3 个批次混合样本

下单前寄 3 份匿名血清（低、中、高值），要求厂家用不同批次各测 3 复孔，回传原始 OD 与浓度。计算批次间斜率比，Acceptance 范围 0.9–1.1。拒绝提供这项服务的供应商，要么对自己抗体没信心，要么根本没有质控体系。

8. 价格陷阱：每孔成本别被大包装忽悠

96T 板报 3 500 元，5 板套装报 14 000 元，看似 8 折，实则校准品、底物、终止液只给 1 套，拆板后第二批就开始缺液。算“每孔成本"＝（抗体板＋校准品＋底物＋终止液＋样本稀释液）/ 可测孔数。真划算的是 2 板独立包装，每孔成本 28–32 元，低于 25 元的要么校准品稀释倍率翻倍，要么检测体积砍到 50 μL，灵敏度直线跳水。

9. 售后：数据异常 24 h 内给实验复核方案

抵抗素 ELISA 常见异常：空白 OD>0.1、高值样本稀释线性失败、回收率 <85%。优质供应商会在说明书中留应急邮箱，附“异常数据回传模板"，48 h 内给出抗体替换或补偿试剂。合同里写清：若复核确认试剂缺陷，厂家承担样本重测费用，按每样本 80 元计算。没有这条，出问题只能自己咽。