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植物可溶性糖含量检测:行业标准NY/T 2742-2015的完整操作细节

更新时间:2026-05-06点击次数:32

采样与杀酶:田间样本的标准化处理

按照NY/T 2742-2015要求,植物叶片或果实采样后必须在30分钟内进行杀酶处理。称取新鲜样品2-5 g,立即放入115℃烘箱中烘15分钟,这一步使内源糖代谢酶失活。随后降温至70℃烘干至恒重(通常需8-12小时)。不可直接使用65℃以下长时间干燥,否则呼吸作用会消耗糖分。烘干样品用粉碎机过60目筛(孔径250 μm),装入具塞磨口瓶,置于干燥器中保存。每份样品平行取两份,一份用于测定,一份作为备份。

乙醇提取的重复次数与判定标准

准确称取0.2000 g干粉于15 mL离心管,加入4 mL 80%乙醇,涡旋混匀。75℃水浴振荡30分钟,每10分钟取出剧烈摇晃10秒。冷却后5000 r/min离心10分钟,上清倒入25 mL容量瓶。残渣再加入3 mL 80%乙醇,同法提取2次。合并三次上清液,用80%乙醇定容至25 mL。判断提取是否-完-全:向第四次提取液(2 mL乙醇)中加入蒽酮试剂,若显蓝色(吸光度>0.03),说明仍有糖残留,需增加提取次数至吸光度低于0.02。

蒽酮显色中硫酸浓度与冷却技巧

蒽酮试剂配制:0.2 g蒽酮溶于100 mL 80%硫酸(密度约1.73 g/mL)。硫酸必须为分析纯,浓度控制在80%±1%。若硫酸浓度过高(85%以上),糖会被碳化出现黑色沉淀;低于75%则显色不-完-全-。吸取1 mL待测液于15 mL具塞试管,冰水浴中缓慢加入4 mL蒽酮试剂,边加边摇匀。加盖后浸入沸水浴中精确加热10分钟,立即转入冰水浴急冷至室温(2分钟内)。急冷使显色产物稳定,否则高温下显色强度持续下降。显色后30分钟内完成比色测定。

回收率试验与色素干扰排查

每批样品至少做两个加标回收:取0.1000 g干粉,加入1 mL 1.0 mg/mL葡萄糖标准溶液,其余同法提取显色。回收率=(加标后测得糖量-样品原含量)/ 加入糖量 × 100%。不同植物组织(如甜菜、胡萝卜)含有大量色素,提取液呈绿色或红色。需在显色前用活性炭脱色:取2 mL提取液,加入10 mg活性炭,室温振荡10分钟,0.45 μm滤膜过滤。同时做活性炭对照——取标准液同样处理,计算活性炭对糖的吸附率(通常小于3%),在结果中校正。


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