一、样本采集：确保检测基础可靠

血磷检测的样本通常为血清或血浆，采集环节直接影响结果准确性。采集前需确认患者状态，建议空腹8-12小时，避免高脂饮食或大量饮用含磷饮料，此类因素可能短暂升高血磷水平。采血管选择需注意抗凝剂类型，常规推荐使用肝素锂抗凝管，避免EDTA或枸橼酸钠抗凝——EDTA会与样本中钙离子结合，干扰磷的检测反应；枸橼酸钠则可能因稀释效应导致结果偏低。采集过程中需避免溶血，红细胞内磷浓度显著高于血浆，轻微溶血即可使检测结果假性升高，操作时应确保针头型号合适、采血后轻柔混匀，避免剧烈震荡。

二、样本前处理：减少干扰因素

采集后的样本需及时离心分离血清或血浆，离心条件建议为3000×g离心10分钟，确保无血细胞残留。若无法立即检测，样本需在2-8℃冷藏保存，保存时间不超过4小时；如需长期保存，应置于-20℃冷冻，避免反复冻融——冻融过程可能破坏细胞结构，释放胞内磷，影响检测结果。前处理阶段还需注意避免样本污染，离心管、移液器吸头需为一次性无磷耗材，实验台面用去离子水清洁，防止环境中磷尘混入。

三、检测方法与仪器操作：标准化流程保障结果精准

临床常用磷检测方法为钼蓝比色法，其原理是无机磷在酸性条件下与钼酸铵反应生成磷钼酸复合物，再经还原剂（如抗坏血酸）还原为蓝色络合物，通过检测660nm波长处吸光度计算磷浓度。操作时需严格遵循仪器说明书，关键步骤包括：

• 试剂准备：按要求复溶校准品、质控品和检测试剂，复溶后需在室温平衡15-20分钟，避免温度差异导致反应速率变化；

• 加样顺序与量：严格控制样本与试剂的比例（如样本10μL+试剂200μL），加样后立即混匀，确保反应充分；

• 反应条件控制：部分仪器需设置37℃恒温反应3-5分钟，反应时间不足会导致显色不-完-全-，过长则可能因光漂白影响吸光度；

• 仪器校准：每日检测前需用配套校准品进行两点校准，校准通过后再进行样本检测，确保仪器处于正常工作状态。

四、结果记录与质量控制：确保数据可靠

检测完成后，仪器会自动计算磷浓度，需注意单位换算（常用单位为mmol/L或mg/dL，换算关系为1mg/dL=0.3229mmol/L）。同步检测高低值质控品，若质控结果在允许范围内（如±2SD），方可报告样本结果；若质控失控，需排查试剂失效、校准异常或仪器故障等原因，重新检测。对于异常结果（如血磷浓度<0.81mmol/L或>1.45mmol/L），需结合患者临床症状复查样本，排除样本采集、处理或仪器操作误差，必要时与临床沟通确认是否存在病理性因素（如肾功能不全、甲状旁腺功能异常等）。