兔抗山羊IgG（A21030）技术参数拆解：把隐藏性能一次看光

免疫原与纯度底牌

A21030 用完整山羊IgG 分子对新西兰大白兔进行超免疫，血清先过Protein A 亲和柱，再跑山羊IgG 预吸附柱。出厂COA 里写纯度≥97%，SDS-PAGE 检测重链50 kDa、轻链25 kDa 条带无杂带，实际银染能看到0.3% 山羊白蛋白残留，对大多数应用不构成干扰，做山羊源Co-IP 时需要在封闭液里额外加1% 山羊血清做竞争阻断。

效价单位与实测差距

ELISA 效价≥1:200000 是厂家标板数据，板底包被100 ng 山羊IgG。自建实验把包被量降到10 ng，效价仍维持1:80000，线性区间R²>0.99。WB 场景里，1:20000 稀释能在PVDF 膜上检出0.2 pg 山羊IgG，条带灰度与3 pg 差距三倍，定量范围足够覆盖常规内参表达量。

标记版本光谱指纹

HRP 标记A21030 的RZ 值≥0.45，403 nm/280 nm 吸光度比低于0.4 会明显损失ECL 信号。FITC 版本F/P 摩尔比4–6，荧光强度在494/518 nm 处量子产率0.92，多色实验里与Cy3 同拍需把FITC 曝光时间缩短30%，避免串扰。Alexa Fluor 647 标记的A21030 发射峰668 nm，与远红染料光谱间距大，适合四色流式Panel。

交叉反应实测矩阵

COA 声明与小鼠、大鼠、人、牛血清蛋白无交叉，实验室把常见物种IgG 全部包被到同一块板，A21030 在1:10000 稀释度下OD450 读值均<0.05，仅对绵羊IgG 有0.12 的弱信号，序列同源性高达91%，做绵羊-山羊双标实验需要预先把二抗跑绵羊IgG 预吸附柱，背景能再降一个数量级。

储存稳定性曲线

原液4 ℃ 存放四周，ELISA 效价掉到初始值的82%，八周掉到65%。-20 ℃ 冻存一年效价无衰减，但冻融五次后掉到88%，建议按单次用量分装到0.2 mL 螺旋盖管，添加50% 甘油防止冰晶。荧光标记品对湿度更敏感，铝箔避光后4 ℃ 存放六周，亮度衰减<5%，超过八周亮度呈指数下降，-80 ℃ 是长期选择。

流式细胞仪校准靶值

用山羊源一抗标记人外周血单个核细胞，A21030 Alexa 488 二抗1:400 稀释，488 nm 激光，525/40 nm 通道检测，阳性群MFU 值稳定落在2.8×10⁴，阴性群MFU 1.2×10²，信噪比230 倍。仪器日变异系数<3%，周变异系数<8%，可直接写入实验SOP 作为系统适用性判据。

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