15527492905
15527492905
技术文章
更新时间：2025-10-21
点击次数：57
流式细胞实验室、核心试剂厂商、IVD 注册部在讨论 IgG4 检测系统时，最终都会落到同一页 Excel：技术参数。数值写错一位，临床性能报告直接退回重审。下面把 IGHG4 相关试剂、质控品、校准品与配套设备的关键参数拆成四大板块，逐条给出测试方法、接受标准与常见踩坑点，方便直接写进采购 URS 或注册资料。
| 参数 | 目标值 | 测试方法 | 文件出处 |
|---|---|---|---|
| 定量下限 LoQ | ≤0.04 g/L | 3×空白标准偏差验证 | CLSI EP17-A2 |
| 检测下限 LoD | ≤0.01 g/L | 60 次零浓度测试的 95 % 百分位 | CLSI EP17-A2 |
| 线性上限 | ≥4.0 g/L | 5 份高值样本等比稀释，R≥0.990 | CLSI EP06-Ed2 |
常见失败原因：试剂缓冲液里 Tween-20 超过 0.05 % 会拉高本底，LoD 瞬间飙到 0.02 g/L 下不去。
| 参数 | 目标值 | 测试方案 |
|---|---|---|
| 重复性 CV | ≤3 % | 同一批试剂测 20 次 0.3 g/L 样本 |
| 中间精密度 CV | ≤5 % | 3 天、3 批试剂、2 名操作员 |
| 相对偏差 | ≤±6 % | 对标 ERM-DA470k 参考血清 |
注意：若采用鼠单抗体系，HAMA 阳性样本会把偏差拉到 +12 %，需要在说明书中声明“当 HAMA>150 ng/mL 时结果可能高估"。
IgG1 交叉：≤0.3 %
IgG2 交叉：≤0.2 %
IgG3 交叉：≤0.1 %
IgA、IgM、IgE 交叉：均 ≤0.05 %
验证方法：把每种干扰蛋白配到 10 g/L，用待测体系回算 IgG4 浓度，结果必须低于 LoQ。多数国产试剂在 IgG1 项翻车，原因是捕获抗体采用鼠抗人 IgG-Fc 通用克隆，不能识别铰链区 G4m(a) 异型。
定值不确定度 ≤±3 %（k=2）
瓶间差 CV ≤1 %（随机 10 瓶）
含防腐剂 ≤0.1 % ProClin300，避免荧光标记淬灭
赋值溯源链：一级标准 NIBSC 67/086 → 工作校准品 → 试剂盒校准品，至少三级
高、中、低 3 水平：0.08 / 0.8 / 3.2 g/L
开瓶稳定性 7 天 2–8 °C，偏差 ≤±5 %
冻干品复溶后 CV ≤2 %
| 模块 | 关键指标 | 推荐值 | 影响点 |
|---|---|---|---|
| 光源 | 卤素灯寿命 | ≥1000 h | 能量下降到 80 % 时 LoQ 上移 15 % |
| 温控 | 反应杯槽 | 37 ± 0.3 °C | 温度漂移 1 °C 带来 4 % 信号偏移 |
| 波长 | 比浊法主波长 | 340 nm | 带宽 ≤8 nm，否则非特异散射增加 |
| 加样针 | 死体积 | ≤30 μL | 决定高值样本稀释次数与试剂浪费 |
| 磁分离 | 剩磁 | ≤0.5 mT | CLIA 平台磁珠残留会抬升本底 |
定标曲线拟合：四参数 Logistic，R²≥0.995
报警阈值：相对残差 >±10 % 自动拒标
数据导出：支持 ASTM 与 HL7，字段需含“IgG4 亚类" Loinc 代码 33702-3
审计追踪：21 CFR Part 11 合规，修改记录留痕 ≥5 年
试剂 2–8 °C 开封稳定性：28 天偏差 ≤±5 %
37 °C 加速 7 天：信号下降 ≤8 %（等同于 12 个月实时）
运输跌落：1 m 自由跌落 3 次，瓶口无裂纹，蛋白浓度变化 ≤2 %
冻融耐受：−20 °C ↔ 室温 3 循环，无肉眼沉淀，CV ≤3 %
防腐剂 ProClin300 浓度 ≤0.1 %，MSDS 第 3 节须标注“对水生生物毒性类别 2"
废液 pH 6.5–8.0，可直接入医院污水处理系统；含 NaN₃ 的废液需单独桶装
校准品含人源组分，HBV、HCV、HIV 核酸检测阴性报告随货同行
注册单元：IgG4 测定试剂盒（免疫比浊法）需提交 3 家临床试验 1200 例数据
参考区间：20–40 岁健康人群 0.03–1.95 g/L（CLSI C28-A3）
说明书页脚必须打印 G4m 异型抗体克隆号，例如“克隆 HP6025，识别 G4m(a) 抗原表位"
当前位置：
上一个：
返回列表
