MMP-3 酶活检测试剂盒选购指导书

1. 行业标准：先对齐尺子

• ISO 9001 认证：厂家必须具备体外诊断原料质量体系，证书编号可在认监委实时查验

• 批次放行标准：CV ≤ 8 %，回收率 90–110 %，线性 r ≥ 0.995，检出限 ≤ 0.05 ng/mL

• 校准品溯源：使用 NIBSC 92/602 国际标准品，每批提供换算系数，确保实验室间可比性

2. 检测原理：荧光底物法

• 底物序列：Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH₂，酶切位点在 Gly-Leu，Km 2.3 μM

• 信号放大：激发 320 nm，发射 405 nm，酶切后荧光强度提升 60 倍，5 min 即可进入线性段

• 抑制对照：试剂盒自带 1 mM GM6001，验证特异性，加样后抑制率应 >95 %

3. 灵敏度与动态范围

• LOD：0.03 ng/mL，对应 3 × SD 空白值，可检出早期关节炎患者滑液中 MMP-3 微升高

• 线性上限：150 ng/mL，超过后可用零校准品 1:5 稀释，回收率仍保持 98 %

• 交叉反应：MMP-1、MMP-9 在 100 ng/mL 浓度下干扰 <0.2 %，无需额外封闭

4. 通量与耗时

高通量筛选优先选 384 孔，单孔成本降低 35 %

5. 品牌实测横评

• R&D DY513：灵敏度 0.02 ng/mL，价格 ¥4800/96 孔，标准品为真核表达，糖基化接近样本

• Abcam ab39305：提供预包被板，减少 30 min 操作，价格 ¥3200，适合新手

• 国产 Biolabbox：价格 ¥1500，线性 r 实测 0.993，与进口差异在 5 % 以内，预算敏感实验室可选

6. 运输与储存条件

• 蓝冰运输：2–8 °C，72 h 内到货，夏季须选顺丰冷链，避免 25 °C 以上暴露

• 冻融稳定性：校准品经 3 次冻融偏差 <4 %，建议到货即分装 50 μL/管，−80 °C 保存

• 底物光稳定性：未开封 2–8 °C 12 个月，开封后 4 周用完，铝箔纸包裹防衰减

7. 常见选购误区

• 只看价格忽略溯源：无 NIBSC 换算系数的批次，发表文章常被审稿人质疑

• 混淆总蛋白与活性：ELISA 测总量，荧光底物法测活性，两者数值无固定比例，选题前确定检测目的

• 忽视样本类型：血清需 1:100 稀释，滑液含透明质酸，需额外 1:200 稀释并离心 12000 g 去除黏度，否则抑制信号

8. 下单清单模板

数量：2 盒 96 孔校准品：含 NIBSC 溯源底物：荧光法，激发 320/发射 405验证数据：含 GM6001 抑制曲线货期：≤ 7 天售后：提供 24 h 技术支持微信通道