IFN-β 选购指南：实验室到临床的全链路决策书

真身辨认：先分清“糖基化"与“非糖基化"

• 糖基化 IFN-β-1a：CHO 细胞表达，166 aa，分子量 22.5 kDa，带 1 个 N80 位点复杂型聚糖；半衰期 10 h，用于倍泰龙、利比。

• 非糖基化 IFN-β-1b：E. coli 包涵体，165 aa，N80→S80 突变，分子量 18.5 kDa，无聚糖；半衰期 4 h，需要 qod 给药。

• PEG-IFN-β-1a：20 kDa 线性 PEG 定点偶联 N80，表观分子量 42 kDa，肾清除率下降 6 倍，给药间隔拉到 2 周。

标签纯度：别让“185 aa 全长"忽悠

• SDS-PAGE 单一条带 ≥98 %，银染无杂带；Western blot 用 7TD1 单抗识别 144–154 表位，杂蛋白 <0.1 %。

• HPLC-SEC 聚集体 <2 %，二聚体峰拖尾因子 0.9–1.1；聚集体过高会触发 TLR2，细胞实验背景飙高。

• 内毒素：临床级 <0.1 EU/10⁶ IU；动物实验级可放宽到 1 EU/10⁶ IU，超过此值小鼠会释放 IL-6 假阳性。

比活性：IU 与 pg 的换算暗坑

• WHO NIBSC 00/572 定义 1 IU = 6 pg 糖基化 IFN-β-1a；E. coli 产品比活性高 1.8 倍，1 IU = 3.3 pg。

• 生物法验证：A549/WISH + VSV 病变抑制，EC50 曲线斜率必须在 −1.8 至 −2.2；斜率过陡提示混有 IFN-α 污染。

• 报告基因捷径：HEK-Blue IFN-β 细胞，ISG54-SEAP 上线 6 h，EC50 与经典生物法偏差 <15 %，适合高通量批次放行。

运输与保存：−70 °C 是硬杠杠

• 液体型：含 0.3 % HSA 稳定剂，−70 °C 五年活性下降 <5 %；−20 °C 一年下降 18 %，不可反复冻融。

• 冻干型：5 % 海藻糖 + 0.5 % 甘露醇，25 °C 加速 28 天活性损失 <3 %，适合野外运输。

• 避光：468 nm 蓝光 30 min 可氧化 Met36，活性掉 40 %；棕色瓶 + 铝箔是标配。

包装规格：按实验规模拆单

• 小试：5×10⁶ IU/支，一次用完免稀释，减少 4 °C 存放；赠送 1 mL 无菌 HSA 稀释液，避免实验室自行配制差异。

• 中试：5×10⁷ IU 一次性袋装，焊接无菌接管，直接连生物反应器，降低开口污染。

• 临床：3×10⁸ IU 预充笔，带 RFID 芯片，记录温度链，冷链断点 30 min 自动报警。

供应商审计：三份文件缺一不可

• FDA BLA 编号：查询 IFN-β-1a 是否持有 STN 125290，核对与所购批次一致性。

• EDMF 文件：看宿主蛋白残留方法是否验证到 1 ppm；无此数据，文章审稿常被 QA 打回。

• 病毒清除验证：至少三步层析 + 纳滤 20 nm，累计清除 LRV ≥18；少了病毒步骤，临床申报发补。

价格陷阱：IU 与 mg 的双单位游戏

• 糖基化产品：1 mg ≈ 1.5×10⁸ IU，标价 ￥8 万/mg；折算 IU 仅 0.5 元/IU，看似便宜，实则比活性低。

• 非糖基化：1 mg ≈ 3.0×10⁸ IU，标价 ￥4.5 万/mg，折算 0.15 元/IU；做细胞实验优先选，动物模型需加大剂量。

• PEG 化：1 mg ≈ 0.8×10⁸ IU，标价 ￥25 万/mg，折算 3.1 元/IU；长周期实验节省人力，综合成本反而低。

售后支持：技术团队响应时限

• 活性争议：24 h 内提供原始 A549/VSV 实验记录，含板位图与 EC50 曲线源文件。

• 换货条款：运输干冰耗尽 12 h 内拍照取证，48 h 内补发新批次，旧货由供应商委托生物废弃物公司回收。

• 应用笔记：提供 10 种细胞系（THP-1、HepG2、Neuro2a 等）的 ISG 诱导 fold 值基线，避免实验室重复踩坑。