大鼠 IL-1β ELISA ：把 7 个隐藏代码一次看懂，不再为“测不到”买单

Rat IL-1β ELISA Kit 市面价从 1200 到 4000 元跨度两倍，价差背后不是简单的“品牌溢价"，而是抗体表位、标准品来源、基质匹配度三条暗线。下面拆成 7 个选购节点，每节点给出可量化的核对数字，照着打分就能在 15 min 内筛掉 80 % 的无效货号。

1. 抗体对表位：锁定 117–267 aa 区域，避开前体序列

IL-1β 合成时是 31 kDa 前体（pro-IL-1β），被 Caspase-1 在 116–117 aa 剪切，成熟体 17 kDa。

核对方法：

• 说明书“Immunogen"写明 “recombinant rat IL-1β (aa 117–267)" 或 “mature region Ser117–Asp267)" 才抓得到分泌型。

• 出现 “aa 1–267 full length" 或 “pro-interleukin-1-beta" 直接淘汰，前体占 50 % 信号，血清测值虚高 2–4 倍。

2. 标准品溯源：E.coli vs CHO，价差 800 元

CHO 糖基化版本接近体内天然结构，做脑脊液或关节滑液选它；E.coli 非糖基化批间差小，做细胞上清更稳。

关键句：COA 里 “Source of Calibrator" 一行写 “expressed in CHO cells" 默认 1 µg 成本 80 元；写 “E.coli" 成本 25 元。按 96T 盒子 4 µg 用量算，CHO 标准品直接推高 200 元出厂价。

3. 灵敏度与线性下限：5 pg/mL 只是“理论"

厂商把 2×SD 空白当 LOD，实际血清里蛋白酶、异嗜性抗体会把背景抬高 3 倍。

实测：

• 取 6 只 SD 大鼠基础血清，加 5、10、20 pg/mL 标准品，回收 80–120 % 的低浓度才是“功能灵敏度"。

• 功能灵敏度 ≤10 pg/mL 的盒子才能测正常大鼠血浆；高于 15 pg/mL 只能测 LPS 或尿酸诱导模型。

4. 基质干扰与最小需求稀释度（MRD）

大鼠血清含 α2-巨球蛋白，能与 IL-1β 形成 1:1 复合物，ELISA 读数偏低。

快速验证：

• 同一血清 1:2、1:5、1:10 稀释，测得值×稀释倍数后偏差 <10 % 的最小稀释比即为 MRD。

• MRD ≤1:5 说明稀释液里已含 0.5 M NaCl + 0.05 % Tween-20，可解离复合物；MRD 1:10 以上浪费样本，增加误差。

5. 交叉反应：IL-1α、IL-1Ra 混进来多少？

IL-1α 与 IL-1β 同源 22 %，抗体稍不纯就交叉。

底线数据：

• 说明书“Cross-reactivity"一栏 IL-1α ≤0.1 %、IL-1Ra ≤0.05 % 才算合格。

• 出现 1 % 交叉的盒子，测 100 pg/mL IL-1β 时，若同时存在 1 ng/mL IL-1α，结果会虚高 10 pg/mL，误差 10 %。

6. 批间差与加速稳定性：37 ℃ 7 天偏差 <8 %

IL-1β 标准品含 3 个半胱氨酸，37 ℃ 氧化后构象改变，ED50 漂移。

核对：COA 第三页“Accelerated stability" 37 ℃ 7 天，标准曲线中点偏差 <8 %；无此项数据的批次，到货立即 –80 ℃ 分装，否则 3 个月后灵敏度下降 20 %。

7. 单孔成本与售后暗条款

96T 盒子标价 2800 元，拆 80 可测孔，单孔 35 元； competitor 2×96T 标价 4800 元，单孔 30 元。

隐藏费用：

• 不含洗液浓缩液，自配 20×PBS-T 成本 180 元。

• 售后只写“质量问题可调换"，把“运输高温导致标准品失活"写进采购合同，厂商才无偿补发，否则自掏腰包 400 元买单独标准品。

8. 五步速选清单（打印贴冰箱）