不同来源的正常小鼠血清在实验中有何差异?

 

一、核心差异来源及影响

 

1.小鼠品系差异（最关键因素之一）

 

不同近交系、远交系或基因修饰小鼠的遗传背景完全不同，导致血清中蛋白质组成、激素水平、免疫分子（如抗体、细胞因子）存在固有差异。

 

近交系小鼠（如C57BL/6、BALB/c、C3H）：遗传背景均一，同一品系不同个体的血清成分稳定，实验重复性好，是科研中常用的血清来源。但不同品系间差异明显：

 

例：C57BL/6小鼠血清中某些补体成分（如C3）含量与BALB/c不同；BALB/c小鼠对特定抗原的抗体基线水平可能更低，适合免疫相关实验。

 

远交系小鼠（如ICR、CD-1）：遗传背景异质，个体间血清成分波动较大，重复性差，仅适用于对均一性要求低的实验（如初步毒性筛选）。

 

基因修饰小鼠（如敲除/敲入小鼠）：即使背景品系相同，目的基因的改造可能影响肝脏合成的血清蛋白（如白蛋白、凝血因子）或免疫分子，此类血清需特别标注，不可替代野生型血清。

 

2.饲养环境与营养差异

 

即使同一品系，饲养条件（饲料、水质、温度、光照）会影响小鼠的代谢和血清成分：

 

饲料营养：高蛋白饲料可能提高血清中总蛋白含量；缺乏某些维生素（如维生素A、D）会导致血清中对应维生素水平下降，影响依赖这些营养素的细胞实验（如上皮细胞分化）。

 

环境应激：饲养密度过高、噪音或频繁操作会使小鼠产生应激反应，导致血清中皮质酮（应激激素）升高，可能抑制免疫细胞活性或影响细胞增殖。

 

3.血清制备工艺差异

 

血清的采集、分离、处理流程不同，会影响其纯度、活性及稳定性：

 

采集方式：心脏采血vs眼眶采血对血清成分影响较小，但反复采血（多次少量）可能导致小鼠贫血，血清中血红蛋白含量升高（影响血清颜色和纯度）。

 

分离与纯化：离心速度（通常3000-4000rpm）、温度（4℃冷藏分离vs室温分离）会影响血清中蛋白质的变性程度；是否经过“热灭活”（56℃30分钟）也会改变成分——热灭活可去除补体活性（避免干扰免疫实验或细胞毒性），但会导致部分生长因子失活（不适合促细胞增殖实验）。

 

储存条件：-20℃冷冻保存vs4℃短期保存，长期反复冻融会导致血清中蛋白质沉淀，降低活性。

 

二、实验中的具体影响案例

 

细胞培养：用老年小鼠血清培养胚胎干细胞，可能因生长因子不足导致增殖速度减慢；用普通级小鼠血清培养免疫细胞，可能因隐性感染的抗体干扰细胞活化检测。

 

免疫实验：用雌性小鼠血清（发情期）做ELISA检测雌激素相关指标，会因内源性雌激素干扰导致结果假阳性；用不同品系小鼠血清作为“阴性对照”，可能因固有抗体差异导致背景值不同。

 

动物模型：给BALB/c小鼠注射C57BL/6小鼠的血清，可能因品系间主要组织相容性复合体（MHC）不同引发免疫排斥反应，干扰移植模型实验。

 

三、实验选择建议

 

为减少差异干扰，实验中需遵循“同源、同条件、标准化”原则：

 

优先选择SPF级近交系小鼠的血清，确保遗传和健康背景均一；

 

明确标注血清来源的品系、年龄、性别、饲养级别，并与实验动物的背景匹配（如用C57BL/6小鼠做模型，就用同品系血清）；

 

统一血清的制备和储存工艺（如是否热灭活、冻存条件），避免批次间差异；

 

关键实验中，建议对血清进行预筛选（如检测目标成分含量、细胞增殖活性），确保符合实验需求。