一、试剂盒概述
CheKine™ 葡萄糖 - 6 - 磷酸（6PG）含量检测试剂盒（微量法）是一种用于检测生物样本中 6PG 含量的工具。6PG 是糖酵解和磷酸戊糖途径的关键中间产物，在糖代谢中具有重要作用。通过检测 6PG 含量，可以深入了解细胞的糖代谢状态，为代谢研究、疾病诊断等提供重要数据。
二、检测原理
在该试剂盒中，6PG 在 6 - 磷酸葡萄糖脱氢酶的催化下与 NADP⁺反应生成 6 - 磷酸葡萄糖酸和 NADPH。NADPH 在 1 - mPMS 的作用下使 WST - 8 显橙黄色，且颜色深浅与 6PG 含量成正比。通过测定 450 nm 处的吸光值，可准确计算 6PG 含量。
三、实验步骤
（一）样本准备
组织样本 ：称取适量组织，用预冷生理盐水洗涤，按质量体积比加入裂解液，冰上匀浆后离心取上清。
细胞样本 ：收集细胞，生理盐水洗涤后，加入裂解液吹打混匀，冰上裂解后离心取上清。
液体样本 ：血清、血浆样本直接离心取上清；尿液等其他液体样本过滤去除杂质后即可检测。
（二）试剂准备
试剂配制 ：按说明书配制工作液、显色液和酶溶液，使用前充分混匀。
试剂预冷 ：将配制好的试剂置于冰上预冷，减少非特异性反应。
（三）反应体系设置
体系构建 ：在微量反应板中依次加入样本、工作液、显色液和酶溶液，轻轻混匀。
反应条件 ：37℃孵育 30 分钟左右，使反应充分进行。
（四）检测
吸光度检测 ：使用酶标仪在 450 nm 波长下测定反应体系的吸光值。
标准曲线绘制 ：用标准品绘制标准曲线，以确定样本中 6PG 的含量。
四、实验结果解读
含量计算 ：根据吸光值和标准曲线计算 6PG 的含量。
结果分析 ：6PG 含量可反映糖代谢状态，如在糖尿病等代谢疾病中，6PG 含量可能异常。
注意事项 ：严格控制反应条件，避免交叉污染，设置对照组以确保结果的可靠性。
五、应用领域
该试剂盒适用于多个领域，包括代谢研究、疾病研究、食品分析和生物技术等，可用于检测动植物组织、细胞、血清、血浆和尿液等样本中的 6PG 含量，助力科研和实际应用。
更新时间：2025-05-19
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